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選擇制備柱時要考慮的要點介紹

更新時間:2022-10-25      瀏覽次數(shù):1087
  制備柱是氣液相的關(guān)鍵部件,主要由兩大類組成,毛細(xì)管柱和填充柱,其中毛細(xì)管柱由兩部分組成:管線和固定相,管線主要有熔融石英和不銹鋼兩種。固定相是色譜分離的關(guān)鍵,它有很多種,大多數(shù)是高分子量、熱穩(wěn)定性好的聚合物,這些聚合物是液體或膠,常用的是聚硅氧烷和聚乙二醇,還有另外常用的固定相是小的多孔顆粒,由聚合物和沸石組成,在色譜實驗過程中選擇合適的產(chǎn)品對實驗的順利開展和實驗結(jié)果的性而言是十分重要的。
 
  今天咱們來聊一聊制備柱的選擇方法:
 
  1、填料基質(zhì)
 
  (1)硅膠基質(zhì):純度高本錢低,強(qiáng)度大,化學(xué)修飾輕易,但pH值范圍有限。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩(wěn)定,但經(jīng)過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10。
 
 ?。?)聚合物基質(zhì):應(yīng)用pH值范圍寬,溫度穩(wěn)定(高溫可以達(dá)到80度以上),機(jī)械強(qiáng)度小。
 
  2、顆粒外形
 
  大多現(xiàn)代HPLC填料都是球形顆粒,但有時是不規(guī)則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長的柱壽命在使用高粘度的活動相時;不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價格。
 
  3、顆粒粒徑
 
  粒徑越小柱效越高、分離度越高,但同時會導(dǎo)致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復(fù)雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。
 
  4、含碳量
 
  含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。高含碳量進(jìn)步柱容量、分辨率及分析時間,用于要求高分離度的復(fù)雜樣品;低含碳量分析時間短、展現(xiàn)不同的選擇性,用于快速分析簡單樣品及需要高含水活動相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。

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